大肠菌群的测定_范文大全

大肠菌群的测定

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【优秀范文】大肠菌群的测定

范文一:粪大肠菌群测定 投稿:宋橗橘

本电子版为发布稿。请以中国环境科学出版社出版的正式标准文本为准。

HJ

中华人民共和国环境保护行业标准

HJ/T 347─ 2007

水质 粪大肠菌群的测定 多管发酵法和滤膜法(试行)

Water quality—Determination of fecal coliform—manifold zymotechnics

and filter membrane

(发布稿)

2007-03-10 发布 2007-05-01 实施

国家环境保护总局 发 布

HJ/T 347—2007

目 次

前言 …………………………………………………………………………………………………Ⅱ 第一篇 多管发酵法

1 适用范围 ……………………………………………………………………………………… 1 2 原理 …………………………………………………………………………………………… 1 3 培养基和试剂 ………………………………………………………………………………… 1 4 步骤 …………………………………………………………………………………………… 2 5 结果的计算 …………………………………………………………………………………… 2 第二篇 滤膜法

1 适用范围 ……………………………………………………………………………………… 4 2 原理 …………………………………………………………………………………………… 4 3 培养基和试剂 ………………………………………………………………………………… 4 4 步骤 …………………………………………………………………………………………… 5 5 结果的计算 …………………………………………………………………………………… 6

前 言

为规划《地表水环境质量标准》(GB3838-2002)的实施工作,制定本试行标准。 本标准规定了地表水、地下水及废水中粪大肠菌群的多管发酵法和滤膜法。 本标准适用于地表水、地下水及废水中粪大肠菌群的测定。 本标准为首次制订。

本标准由国家环境保护总局科技标准司提出。

本标准由国家环境保护总局水和废水监测分析方法编委会组织中国环境监测总站等单位起草。 本标准国家环境保护总局2007年3月10日批准。 本标准自2007年5月1日起实施。 本标准由国家环境保护总局解释。

水质 粪大肠菌群的测定

粪大肠菌群是总大肠菌群中的一部分,主要来自粪便。在44.5℃温度下能生长并发酵乳糖产酸产气的大肠菌群称为粪大肠菌群。用提高培养温度的方法,造成不利于来自自然环境的大肠菌群生长的条件,使培养出来的菌主要为来自粪便中的大肠菌群,从而更准确地反映出水质受粪便污染的情况。粪大肠菌群的测定可以用多管发酵法和滤膜法。

第一篇 多管发酵法

1 适用范围

本标准适用于地表水、地下水及废水中粪大肠菌群的测定。

2 原理

多管发酵法是以最可能数(most probable number)简称MPN来表示试验结果的。实际上它是根据统计学理论,估计水体中的大肠杆菌密度和卫生质量的一种方法。如果从理论上考虑,并且进行大量的重复检定,可以发现这种估计有大于实际数字的倾向。不过只要每一稀释度试管重复数目增加,这种差异便会减少,对于细菌含量的估计值,大部分取决于那些既显示阳性又显示阴性的稀释度。因此在实验设计上,水样检验所要求重复的数目,要根据所要求数据的准确度而定。

3 培养基和试剂

本标准所用试剂除另有注明外,均为符合国家标准的分析纯化学试剂;实验用水为新制备的去离子水。

3.1单倍乳糖蛋白胨培养液:

成分: 蛋白胨 10g

牛肉浸膏 3g 乳糖 5g 氯化钠 5g 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液 1mL

蒸馏水 1000mL

制法:将蛋白胨、牛肉浸膏、乳糖、氯化钠加热溶解于1000mL蒸馏水中,调节pH为7.2~7.4,再加入1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1mL,充分混匀,分装于含有倒置的小玻璃管的试管中,于高压蒸汽灭菌器中,在115℃灭菌20min,贮存于暗处备用。 3.2 三倍乳糖蛋白胨培养液:按上述配方比例三倍(除蒸馏水外),配成三倍浓缩的乳糖蛋白胨培养液,制法同上。

3.3 EC培养液:

成分: 胰胨 20g

乳糖 5g 胆盐三号 1.5g 磷酸氢二钾(K2HPO4) 4g 磷酸二氢钾(KH2PO4) 1.5g 氯化钠 5g 蒸馏水 1000mL

制法:将上述成分加热溶解,然后分装于含有玻璃倒管的试管中。置高压蒸汽灭菌器中,115℃灭菌20min。灭菌后pH应为6.9。 3.4 培养基的存放

在密封瓶中的脱水培养基成品要存放在大气湿度低、温度低于30℃的暗处,存放时应避免阳光直接照射,并且要避免杂菌侵入和液体蒸发。当培养液颜色变化,或体积变化明显时废弃不用。

4 步骤

4.1 水样接种量

将水样充分混匀后,根据水样污染的程度确定水样接种量。每个样品至少用三个不同的水样量接种。同一接种水样量要有五管。

相对未受污染的水样接种量为10mL、1mL、0.1mL。受污染水样接种量根据污染程度接种1mL、0.1mL、0.01mL或0.1mL、0.01mL、0.001mL等。使用的水样量可参考下表1。

表1 接种用水量参考表

水样种类 井水

河水、塘水 湖水、塘水 城市原污水

检测方法 多管发酵法 多管发酵法 多管发酵法 多管发酵法

接种量(mL)

100 50 10 1 0.1 10-2 10-3 10-4 10-5 × × × × × × × × × × × ×

如接种体积为10mL,则试管内应装有三倍浓度乳糖蛋白胨培养液5mL;如接种量为1mL或少于

1mL,则可接种于普通浓度的乳糖蛋白胨培养液10mL中。 4.2 初发酵试验

将水样分别接种到盛有乳糖蛋白胨培养液的发酵管中。在37℃±0.5℃下培养24h±2h。产酸和产气的发酵管表明试验阳性。如在倒管内产气不明显,可轻拍试管,有小气泡升起的为阳性。 4.3 复发酵试验

轻微振荡初发酵试验阳性结果的发酵管,用3mm接种环或灭菌棒将培养物转接到EC培养液中。在44.5℃±0.5℃温度下培养24h±2h(水浴箱的水面应高于试管中培养基液面)。接种后所有发酵管必须在30min内放进水浴中。培养后立即观察,发酵管产气则证实为粪大肠菌群阳性。

5 结果的计算

根据不同接种量的发酵管所出现阳性结果的数目,从表2或表3中查得每升水样中的粪大肠菌群。接种水样为100mL2份、10mL10份、总量300mL时,查表2可得每升水样中的粪大肠菌群;接种5份10mL水样、5份1mL水样、5份0.1mL水样时,查表3求得MPN指数,MPN值再乘10,即为1L水样中的粪大肠菌群。

如果接种的水样不是10mL、1mL和0.1mL,而是较低的或较高的三个浓度的水样量,也可查表3求得MPN值,再经下式计算成每100mL的MPN值。

MPN值=MPN指数×

10(mL)

接种量最大的一管mL表2 粪大肠菌群检数表

(接种水样100mL2份、10mL10份、总量300m)

100mL水量的阳性瓶数

10mL水量的阳性管数

1L水样中粪大肠菌群数

1L水样中粪大肠菌群数

1L水样中粪大肠菌群数

0 1 2

0 230

表3 最可能数(MPN)表

(接种5份10mL水样、5份1mL水样、5份0.1mL水样时,不同阳性及阴性

情况下100mL水样中细菌数的最可能数和95%可信限值)

每100mL水出现阳性份数 95%置信区间

10mL 1mL 0.1mL 样中细菌数

下限 上限

的最可能数 管 管 管 0 0 0

0 0 1 0 1 0 0 2 0 1 0 0 1 0 1 1 1 0 1 1 1 1 2 0 2 0 0 2 0 1 2 1 0 2 1 1 2 2 0

每100mL水出现阳性份数 95%置信区间

10mL1mL 0.1mL样中细菌数

下限 上限

的最可能数 管 管 管

26

27 33 34 23 34 43 33 46 63 49 70 94 79

4 2 1

2 3 0 3 0 0 3 0 1 3 1 0 3 1 1 3 2 0 3 2 1 3 3 0 4 0 0 4 0 1 4 1 0 4 1 1 4 1 2 4 2 0 12 8 11 11 14 14 17 17 13 17 17 21 26 22 3 28 5 3 1 110 31 250 1 19 5 3 2 140 37 310 2 25 5 3 3 180 44 500 2 25 5 4 0 130 35 300 4 34 5 4 1 170 43 190 4 34 5 4 2 220 57 700 5 46 5 4 3 280 90 850 5 46 5 4 4 350 120 1000 3 31 5 5 0 240 68 750 5 46 5 5 1 350 120 1000 5 46 5 5 2 540 180 1400 7 63 5 5 3 920 300 3200 9 78 5 5 4 1600 640 5800 7 67 5 5 5 ≥2400

第二篇 滤膜法

1 适用范围

本标准适用于一般地表水、地下水及废水中粪大肠菌群的测定。用于检验加氯消毒后的水样时,在滤膜法之前,应先做实验,证实它所得的数据资料与多管发酵试验所得的数据资料具有可比性。

2 原理

滤膜是一种微孔性薄膜。将水样注入已灭菌的放有滤膜(孔径0.45μm)的滤器中,经过抽滤,细菌即被截留在膜上,然后将滤膜贴于M−FC培养基上,44.5℃温度下进行培养,计数滤膜上生长的此特性的菌落数,计算出每1L水样中含有粪大肠菌群数。

3 培养基和试剂

本标准所用试剂除另有注明外,均为符合国家标准的分析纯化学试剂;实验用水为新制备的去离子水。

3.1 M−FC培养基:

成分: 胰胨 10g

蛋白胨 5g 酵母浸膏 3.0g 氯化钠 5.0g 乳糖 12.5g 胆盐三号 1.5g 1%苯胺蓝水溶液 10mL

1%玫瑰色酸溶液(溶于0.2mol/L氢氧化钠液中) 10mL

蒸馏水 1000mL

制法:将上述培养基中的成分(除苯胺蓝和玫瑰色酸外),置于蒸馏水中加热溶解,调节pH为7.4,

分装于小烧瓶内,每瓶100mL,于115℃灭菌20min。贮于冰箱中备用。临用前,按上述配方比例,用灭菌吸管分别加入已煮沸灭菌的1%苯胺蓝溶液1mL及新配制的1%玫瑰色酸溶液(溶于0.2mol/L氢氧化钠液中)1mL,混合均匀。加热溶解前,加入1.2%~1.5%琼脂可制成固体培养基。如培养物中杂菌不多,则培养基中不加玫瑰色酸亦可。 3.2 培养基的存放

在密封瓶中的脱水培养基成品要存放在大气湿度低、温度低于30℃的暗处,存放时应避免阳光直接照射,并且要避免杂菌侵入和液体蒸发。当培养液颜色变化,或体积变化明显时废弃不用。

4 步骤

4.1 水样量的选择:水样量的选择根据细菌受检验的特征和水样中预测的细菌密度而定。如未知水样中粪大肠菌的密度,就应按下表所列体积过滤水样,以得知水样的粪大肠杆菌密度。先估计出适合在滤膜上计数所应使用的体积,然后再取这个体积的1/10和10倍,分别过滤。理想的水样体积是一片滤膜上生长20~60个粪大肠菌群菌落,总菌落数不得超过200个。使用的水样量可参考下表。

水样种类 较清洁的湖水 一般的江水 城市内的河水 城市原污水

检测方法 滤膜法 滤膜法 滤膜法 滤膜法

接种量(mL)

100 50 10 1×

× ×

× ×

××

0.1 × ×

10-2 10-3 10-4 10-5 × ×

×

4.2 滤膜及滤器的灭菌:将滤膜放入烧杯中,加入蒸馏水,置于沸水浴中煮沸灭菌三次,每次15min。前两次煮沸后需更换水洗涤2~3次,以除去残留溶剂。也可用121℃灭菌10min,10min一到,迅速将蒸汽放出,这样可以尽量减少滤膜上凝集的水分。滤器、接液瓶和垫圈分别用纸包好,在使用前先经121℃高压蒸汽灭菌30min。滤器灭菌也可用点燃的酒精棉球火焰灭菌。 4.3

过滤装置安装:以无菌操作把滤器装置依照下图装好。

4.4过滤:用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘,将粗糙面向上,贴放在已灭菌的滤床上,稳妥地固定好滤器。将适量的水样注入滤器中,加盖,开动真空泵即可抽滤除菌。

3.5 培养:使用M−FC培养基。培养基含或不含琼脂,不含琼脂的培养基使用已用M-FC培养基饱和的无菌吸收垫。将滤过水样的滤膜置于琼脂或吸收垫表面。将培养皿紧密盖好后,置于能准确恒温于44.5℃±0.5℃的恒温培养箱或恒温水浴中,经24h±2h培养。若用恒温水浴培养,则需用防水胶带贴封每个平皿,将培养皿成叠封入防水塑料袋或容器内,浸没在44.5℃±0.5℃恒温水浴中。在培养时间内,装培养皿的塑料袋必须用重物坠于水面之下,以保持所需的严格温度。所有已制备的培养物都应在过滤后30min内浸入水浴内。

5 结果的计算

粪大肠菌群菌落在M−FC培养基上呈蓝色或蓝绿色,其他非粪大肠菌群菌落呈灰色、淡黄色或无色。正常情况下,由于温度和玫瑰酸盐试剂的选择性作用,在M−FC培养基上很少见到非粪大肠菌菌落。必要时可将可疑菌落接种于EC培养液,44.5℃±0.5℃培养24h±2h,如产气则证实为粪大肠菌群。

计数呈蓝或蓝绿色的菌落,计算出每1L水样中的粪大肠菌群数。

粪大肠菌群菌落数(个/L)=

滤膜上生长的粪大肠菌群菌落数×1000

过滤水样量(ml)

范文二:大肠菌群的测定 投稿:韦熉熊

FSPTSTG013糖果大肠菌群的测定乳糖发酵法F_SP_TS_TG_013

糖果

1

范围

本方法采用乳糖发酵法测定糖果中大肠菌群的MPN值。

本方法适用于糖果中大肠菌群的测定,以MPN/100mL报告其结果。2

原理

大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来源于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。33.13.2

试剂

溴甲酚紫溶液,0.4g/L

乳糖胆盐发酵管:将蛋白胨20g、猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g及乳糖10g溶于1000mL水

大肠菌群的测定乳糖发酵法

中,校正PH至7.4,加入溴甲酚紫溶液25mL,混匀后分装每管10mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min。。3.3

双料乳糖胆盐发酵管:将蛋白胨40g、猪胆盐(或牛、羊胆盐)10g及乳糖20g溶于1000mL

水中,校正PH至7.4,加入溴甲酚紫溶液50mL,混匀后分装每管10mL,并放入一个小倒管,

115℃高压灭菌15min3.4

乳糖发酵管:将蛋白胨20g及乳糖10g溶于1000mL水中,校正PH至7.4,加入溴甲酚紫

溶液25mL,混匀后按检验要求分装30mL、10mL、3mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌

国中

1℃

0.5℃

15min。3.5

EC肉汤:将胰蛋白胨20g、3号胆盐(或混合胆盐)1.5g、乳糖5g、磷酸氢二钾4g、磷酸

二氢钾1.5g及氯化钠5g混合,溶于1000mL水中,溶解后分装有发酵倒管的试管中,并放入一

个小倒管,121℃高压灭菌15min,最终PH为6.93.6

0.2。

伊红美蓝琼脂平板:将蛋白胨10g、磷酸氢二钾2g及琼脂17g溶解于蒸馏水中,校正PH至

7.1分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min,临用时加入乳糖10g并加热溶化琼脂,冷至50~55℃,加入伊红美蓝溶液(6.5g/L)10mL,摇匀,倾注平板。3.7

革兰氏染色液:

3.7.1结晶紫染色液:将1g结晶紫溶解于20mL乙醇(950g/L)中,然后与80mL草酸铵溶液(10g/L)混合均匀。

3.7.2革兰氏碘液:将1g碘与2g碘化钾先进行混合,加入蒸馏水少许,充分振摇,待完全溶解后,再加蒸馏水至300mL。

3.7.3沙黄复染液:将0.25g沙黄溶解于10mL乙醇(950g/L)中,然后用蒸馏水稀释至100mL。44.14.2

仪器温箱:36恒温水浴:44.5

4.355.15.1.15.1.25.1.35.1.4

显微镜操作步骤检样稀释

用灭菌镊子夹去包装纸,称取数块共25g,加入预温至45℃的灭菌生理盐水225mL,等溶用1mL灭菌吸管吸取1:10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1根据饮料卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度接种3管。将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量分别为10mL、1mL、0.1mL,接种量在lmL

化后检验,即为1:10稀释液。

试管内,振摇试管混匀,做成1:100的稀释液。mL灭菌吸管。5.2乳糖发酵试验

以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,lmI,及lmL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36士l℃温箱内,培养24士2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。5.3分离培养

将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36士1℃温箱内,培养18一24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。5.4革兰氏染色试验

将涂片在火焰上固定,滴加结晶紫染色液,染1min,水洗,然后滴加革兰氏碘液,作用1min,水洗,再滴加乙醇(950g/L)脱色约30s,(或将乙醇滴满整个涂片,立即倾去,再用乙醇滴满整个涂片,脱色10s)水洗,最后滴加沙黄复染液复染1min。水洗,待干,镜检。革兰氏阳性菌呈紫色,阴性菌呈红色。5.5证实试验

在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1~2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置36士1℃温箱内培养24士2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。5.6报告

根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL大肠菌群的MPN值。6

参考文献

GB4789.3-2003食品卫生微生物学检验大肠菌群测定

GB4789.24-2003食品卫生微生物学检验糖果、糕点、蜜饯检验GB4789.28-2003食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂

国中

附表1

大肠菌群最可能数(MPN)检索表

阳性管数

1mL(g)

00000000000000001111111111111111222222

0.1mL(g)

00001111222233330000111122223333000011

0.01mL(g)

01230123012301230123012301230123012301

MPN100mL(g)

95%可信限下限

上限90

1030230360

3010303070

360

360370

440890

22222222223333333333333333

11222233330000111122223333

23012301230123012301230123

270340210280350420290360440530230390640950430750120016009301500210029002400460011000≥24000

4070150701403001503003503607101500

120013003800210023003800380044004700130002400048000

40100

4701500

注:1本表采用3个稀释度[1mL(g)、0.1mL(g)和0.01mL(g)],每稀释度3管。

2表内所列检样量如各增加10倍时,则表内数字相应降低10倍,如检样量各降低10倍时,则表内数字相应增加10倍,其余可类推。

范文三:粪大肠菌群的测定 投稿:白鋆鋇

粪大肠菌群的测定

1 卫生学意义

粪大肠菌群测定的卫生学意义:一、与大肠菌群相比,粪大肠菌群在人和动物粪便中所占的比例较大,而且在自然界容易死亡。因此,粪大肠菌群的存在表明食品近期内可能直接或间接的受到了粪便的污染;二、作为粪便污染指标评价食品的卫生状况,推断食品中肠道致病菌污染的可能性;三、常用做贝类和贝类养殖用水的卫生指标 。

2 检验方法

2.1 术语与定义

一群在44.5℃培养24h-48h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌。

卫生学概念,又称为耐热大肠菌群,主要是大肠杆菌,但也包括克雷伯氏菌属等。

2.2 设备和材料

除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:

(1)恒温培养箱:36℃±1℃。

(2)冰箱:2℃~5℃。

(3)恒温水浴箱:46℃±1℃。

(4)天平:感量0.1g。

(5)无菌吸管:1mL(具0.01mL刻度)、10mL(具0.1mL刻度)或微量移液器及吸头。

(6)无菌锥形瓶:容量500mL。

(7)无菌培养皿:直径90mm。

(8)pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。

2.3 培养基和试剂

(1)月桂基硫酸盐胰蛋白胨(Lauryl Sulfate Tryptose,LST)肉汤:

1)成分:胰蛋白胨或胰酪胨:20.0g;氯化钠:5.0g;乳糖:5.0g;磷酸氢二钾(K2HPO4):2.75g;磷酸二氢钾(KH2PO4):2.75g;月桂基硫酸钠:0.1g;

蒸馏水:1000mL;pH:6.8±0.2

2)制法:将上述成分溶解于蒸馏水中,调节 pH。分装到有玻璃小倒管的试管中,每管10 mL。121 ℃高压灭菌15 min。

(2)EC肉汤(E.coli,BGLB):

1)成分:胰蛋白胨或胰酪胨:20.0 g;3号胆盐或混合胆盐:1.5 g;乳糖:5.0g;磷酸氢二钾(K2HPO4):4.0g;磷酸二氢钾(KH2PO4):1.5g;氯化钠:5.0g;

蒸馏水:1000mL;pH:6.9±0.1。

2)制法:将上述成分溶于约蒸馏水中,调节pH,分装到有玻璃小导管的试管中,每管8mL,121℃高温灭菌15min。

(3)无菌生理盐水:

1)成分:氯化钠:8.5 g;蒸馏水:1000mL;

2)制法:称取8.5g氯化钠溶于1000mL蒸馏水中,121℃高压灭菌15min。

2.4 检验程序

2.5 操作步骤

(1)初发酵

选择适宜的三个连续稀释度的样品匀液。每个稀释度接种三管月桂基磺酸盐胰蛋白胨(LST)肉汤,每管接种1mL(如接种量需要超过1mL,则用双料LST肉汤)。36℃±1℃培养24h±2h,检查倒管内是否有气泡产生或轻摇试管时是否有密集连续的细小气泡从管底逸出,如未产气则继续培养至48h±2h。记录在24h和48h内产气的LST肉汤管数。未产气者为粪大肠菌群阴性;对产气者,则进行复发酵试验。

(2)复发酵

用接种环从所有48h±2h内发酵产气的LST肉汤管中分别取培养物1环,移种于已提前预温至45℃的EC肉汤管中。将所有接种的EC肉汤管放入于带盖的44.5℃±0.2℃恒温水浴箱内,水浴的水面应高于肉汤培养基液面,培养24h±2h,记录EC肉汤管的产气情况。产气管为粪大肠菌群阳性,不产气为粪大肠菌群阴性。

注:EC肉汤管在接种之前要提前预温至45℃,因为这个温度是选择性生长的条件之一,如果不提前预温,那些能够在44.5度以下生长的非粪大肠菌群类细菌在培养基的升温阶段就可能已经生长并发酵乳糖产气了。

2.6 结果与报告

证实为粪大肠菌群的阳性管数,

群MPN值。

查(MPN)表, 报告每g(mL)样品中粪大肠菌

范文四:大肠菌群测定 投稿:陈豀豁

大肠菌群测定.txt男人应该感谢20多岁陪在自己身边的女人。因为20岁是男人人生的最低谷,没钱,没事业;而20岁,却是女人一生中最灿烂的季节。只要锄头舞得好,哪有墙角挖不到?大肠菌群测定.txt如果我穷得还剩下一碗饭 我也会让你先吃饱全天下最好的东西都应该归我所有,包括你!!  先说喜欢我能死啊?别闹,听话。  有本事你就照顾好自己,不然就老老实实地让我来照顾你!  食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定

  1 主题内容与适用范围  本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。  本标准适用于食品中大肠菌群的测定。  2 术语  大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来源于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。  食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。  3 引用标准  GB 4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂  4 设备和材料  4.1 温箱:36±1℃。  4.2 冰箱:0~4℃。  4.3 恒温水浴:44.5±0.5℃。  4.4 天平。  4.5 显微镜。  4.6 均质器或乳钵。  4.7 平皿:直径为90mm。  4.8 试管。  4.9 吸管。    4.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。  4.11 玻璃珠:直径约5mm。  4.12 载玻片。  4.13 酒精灯。  4.14 试管架。  5 培养基和试剂  5.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。  5.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25沥规定。  5.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。  5.4 EC肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。  5.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。  5.6 生理盐水。  5.7 革兰氏染色液:按GB 4789.28中2.2规定。  6 检验程序  大肠菌群检验程序如下:  (图略)  7 操作步骤  7.1 检样稀释  7.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000~10000r/min的速度处理1min,做成1∶10的均匀稀释液。  7.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1∶100的稀释液。  7.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管。  7.1.4 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个

稀释度,每个稀释度接种3管。  7.2 乳糖发酵试验  将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃温箱内,培养24±2h,如所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。  7.3 分离培养  将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃温箱内,培养18~24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。  7.4 证实试验  在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1~2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。  7.5 报告  根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。  8 粪大肠菌群(faecal coliform)   8.1 用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物(见7.2条)转种于EC肉汤管内,置44.5±0.2℃水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面),培养24±2h,经培养后,如所有EC肉汤管均不产气,则可报告为阴性;如有产气者,则将所有产气的EC肉汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃培养18~24h,凡平板上有典型菌落者,则证实为粪大肠菌群阳性。  8.2 结果报告  根据证实为粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)粪大肠菌群的MPN值。  大肠菌群最可能数(MPN)检索表

范文五:大肠菌群测定 投稿:廖绉绊

大肠菌群测定.txt如果你同时爱几个人,说明你年轻;如果你只爱一个人,那么,你已经老了;如果你谁也不爱,你已获得重生。积极的人一定有一个坚持的习惯。食品卫生微生物学检验 大肠菌群测定

  1 主题内容与适用范围  本标准规定了食品中大肠菌群的测定方法。  本标准适用于食品中大肠菌群的测定。  2 术语  大肠菌群系指一群能发酵乳糖、产酸产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。该菌主要来源于人畜粪便,故以此作为粪便污染指标来评价食品的卫生质量,推断食品中有否污染肠道致病菌的可能。  食品中大肠菌群数系以100mL(g)检样内大肠菌群最可能数(MPN)表示。  3 引用标准  GB 4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法、培养基和试剂  4 设备和材料  4.1 温箱:36±1℃。  4.2 冰箱:0~4℃。  4.3 恒温水浴:44.5±0.5℃。  4.4 天平。  4.5 显微镜。  4.6 均质器或乳钵。  4.7 平皿:直径为90mm。  4.8 试管。  4.9 吸管。    4.10 广口瓶或三角烧瓶:容量为500mL。  4.11 玻璃珠:直径约5mm。  4.12 载玻片。  4.13 酒精灯。  4.14 试管架。  5 培养基和试剂  5.1 乳糖胆盐发酵管:按GB 4789.28中4.9规定。  5.2 伊红美蓝琼脂平板:按GB 4789.28中4.25沥规定。  5.3 乳糖发酵管:按GB 4789.28中4.10规定。  5.4 EC肉汤:按GB 4789.28中4.11规定。  5.5 磷酸盐缓冲稀释液:按GB 4789.28中3.22规定。  5.6 生理盐水。  5.7 革兰氏染色液:按GB 4789.28中2.2规定。  6 检验程序  大肠菌群检验程序如下:  (图略)  7 操作步骤  7.1 检样稀释  7.1.1 以无菌操作将检样25mL(或g)放于含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内(瓶内予置适当数量的玻璃珠)或灭菌乳钵内,经充分振摇或研磨做成1∶10的均匀稀释液。固体检样最好用均质器,以8 000~10000r/min的速度处理1min,做成1∶10的均匀稀释液。  7.1.2 用1mL灭菌吸管吸取1∶10稀释液1mL,注入含有9mL灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内,振摇试管混匀,做成1∶100的稀释液。  7.1.3 另取1mL灭菌吸管,按上条操作依次做10倍递增稀释液,每递增稀释一次,换用1支1mL灭菌吸管。  7.1.4 根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择三个稀释度,每个稀释度接种3管。  7.2 乳糖发酵试验  将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内,接种量在1mL以上者,用双料乳糖胆盐发酵管,1mL及1mL以下者,用单料乳糖胆盐发酵管。每一稀释度接种3管,置36±1℃温箱内,培养24±2h,如

所有乳糖胆盐发酵管都不产气,则可报告为大肠菌群阴性,如有产气者,则按下列程序进行。  7.3 分离培养  将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃温箱内,培养18~24h,然后取出,观察菌落形态,并做革兰氏染色和证实试验。  7.4 证实试验  在上述平板上,挑取可疑大肠菌群菌落1~2个进行革兰氏染色,同时接种乳糖发酵管,置36±1℃温箱内培养24±2h,观察产气情况。凡乳糖管产气、革兰氏染色为阴性的无芽胞杆菌,即可报告为大肠菌群阳性。  7.5 报告  根据证实为大肠菌群阳性的管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)大肠菌群的MPN值。  8 粪大肠菌群(faecal coliform)   8.1 用接种环将所有产气的乳糖胆盐发酵管培养物(见7.2条)转种于EC肉汤管内,置44.5±0.2℃水浴箱内(水浴箱内的水面应高于EC肉汤液面),培养24±2h,经培养后,如所有EC肉汤管均不产气,则可报告为阴性;如有产气者,则将所有产气的EC肉汤管分别转种于伊红美蓝琼脂平板上,置36±1℃培养18~24h,凡平板上有典型菌落者,则证实为粪大肠菌群阳性。  8.2 结果报告  根据证实为粪大肠菌群的阳性管数,查MPN检索表,报告每100mL(g)粪大肠菌群的MPN值。  大肠菌群最可能数(MPN)检索表

范文六:大肠菌群测定 投稿:余戳戴

上海市委下发了本市医改《实施意见》

日前,市委正式下发了《中共上海市委、上海市人民政府关于贯彻中共中央、国务院关于深化医药卫生体制改革的意见的实施意见》(沪委发〔2011〕10号)。文件指出,医药卫生事业发展是重大民生问题,关系千家万户幸福。深化医药卫生体制改革是坚持以人为本、保障和改善民生、促进人的全面发展的必然要求,是发展社会事业、促进社会和谐的有力保障,是促进经济平稳较快发展的重要举措。为贯彻《中共中央、国务院关于深化医药卫生体制改革的意见》(中发〔2009〕6号)和国务院印发的《医药卫生体制改革近期重点实施方案(2009-2011年)》(国发〔2009〕12号),建立符合我国国情、具有上海特色的医药卫生体制,建设覆盖城乡居民的基本医疗卫生制度,逐步实现人人享有基本医疗卫生服务的目标,逐渐提高城乡居民的保障水平。

文件提出深化医药卫生体制改革的指导思想:以邓小平理论和“三个代表”重要思想为指导,深入贯彻落实科学发展观,以提高居民健康水平为根本出发点和落脚点,坚持基本医疗卫生服务的公益性,遵循医药卫生发展规律,借鉴国际国内先进经验,按照“保基本、强基层、建机制”和“打基础、管长远、可持续”的要求,突出惠民为本、预防为主、能力提升、制度支撑,促进医药卫生事业科学发展,为居民提供安全、有效、公平、可及的基本医疗卫生服务,加强健康管理,不断提高居民健康素质和生活质量。

基本原则:一是坚持国家要求与上海特色相结合。既要坚决贯彻落实国家深化医药卫生体制改革的总体要求和政策措施,又要发挥主动性和创造性,结合上海实际,积极探索创新。二是坚持系统设计与重点突破相结合。既要坚持统筹谋划,明确改革方向,完善制度体系,又要针对当前医药卫生工作的主要问题,找准突破口,合理设计改革路径,稳妥有序推进。三是坚持政府主导与发挥市场机制作用相结合。既要强化政府责任和投入,确立政府在保障基本医疗卫生服务中的主导地位,又要发挥市场机制作用,鼓励社会参与,提高运行效率,满足不同层次的医疗卫生需求,实现公平与效率的统一。四是坚持尽力而为与量力而行相结合。既要加快推进医药卫生事业发展,满足居民不断增长的医疗卫生服务需求,又要从国情和市情出发,充分考虑经济社会发展水平和政府、社会、个人的承受能力。五是坚持提高居民满意度与调动医务人员积极性相结合。既要坚持把最广大人民群众是否满意作为衡量改革成效的根本标准,使改革成果真正惠及广大人民群众,又

要切实保障医务人员的合理利益,使医务人员成为改革的践行者、主力军。

总体目标:建立健全覆盖城乡居民的基本医疗卫生制度,实现人人享有基本医疗卫生服务;加强健康管理,提高居民健康素质和生活质量,使居民主要健康指标达到世界先进水平;加快发展现代医疗服务业,满足居民多层次、多样化的医疗卫生需求;进一步发展医学科技,提高医疗卫生服务能力和管理水平,建成亚洲医学中心城市之一。

具体目标:1、健全公共卫生体系,实现基本公共卫生服务均等化,预防和控制重大疾病和公共卫生危害因素,完善公共卫生应急保障机制,提高食品安全监管水平和综合协调能力,构建与特大型城市相适应的公共卫生服务体系。2、完善医疗服务体系,优化医疗资源布局和结构,推进医疗资源整合,改善基本医疗服务可及性,提高医疗资源配置效率和医疗服务水平,加快发展现代医疗服务业,满足居民多层次需求。3、完善基本医疗保障制度,实现基本医疗保障制度覆盖本市城乡居民,推进各类医保制度衔接,缩小医保待遇差距,完善医疗保险支付方式,进一步提高总体保障水平。4、完善药品供应保障体系,建立并全面实施基本药物制度,探索构建科学合理的药品招标采购制度,确保基本药物公平可及、安全有效、合理使用,减轻居民医药费用负担。5、推进公立医院改革,初步建立科学的管理体制、补偿机制、运行机制、监管机制,维护公立医院公益性,调动医务人员积极性,保障居民基本医疗服务。6、促进卫生发展方式和服务模式转变,积极推进发展方式从以外延发展为主转变为以内涵发展为主,健康服务策略从以治疗为中心的疾病管理转变为以健康为中心的全程管理,卫生管理方式从传统管理转变为现代化、专业化、精细化管理。7、让群众普遍得到实惠,减少疾病、病有所医、就医方便、减轻负担,共享医药卫生体制改革的成果。

文件的主要内容:一、完善医药卫生体系,建立覆盖城乡、公平可及的基本医疗卫生制度。完善公共卫生服务体系,保障城市公共卫生安全,建设健康城市;完善医疗服务体系,提高各级医疗机构服务能力,为居民提供优质便捷的医疗服务;完善医疗保障体系,实现广覆盖,改善公平性,提高保障水平;完善药品供应保障体系,促进科学合理用药,减轻居民负担。这四大体系相辅相成、配套建设、协调发展,形成“四位一体”的基本医疗卫生制度。

(一)公共卫生服务体系:让居民远离健康危害因素。

1、建设健康城市。以健康环境、健康社会、健康人群协调发展为目标,推进健康城市建

设。加强城市环境保护和污染控制,不断改善城市面貌和环境质量,加强社区、学校、企业、商务楼宇等健康场所建设,营造宜居的健康生活环境。建立健康城市建设的部门协同机制、政策保障机制、监测评估机制、社会支持机制和公众参与机制,形成促进全民健康的制度体系。加强居民健康管理,开展卫生科普教育,普及健康知识,开展健康生活方式行动,引导居民开展健康自我管理活动,形成健康生活理念,提高全体居民的健康素养。

2、健全公共卫生服务体系。完善由市和区县疾病预防控制、卫生监督、妇幼卫生、精神卫生、院前急救、采供血、健康教育、计划生育等专业公共卫生服务机构和社区卫生服务机构构成的三级公共卫生服务网络。充分发挥医疗机构临床预防功能,完善医防结合的工作模式。加强公共卫生绩效评估,提高服务质量和效率。

3、实现基本公共卫生服务均等化。贯彻实施国家基本公共卫生服务项目,在此基础上,根据本市经济社会发展和主要公共卫生问题的变化,按照受益面广、健康危害程度高、干预效果好、成本效益显著、方便实施的原则,及时调整充实本市基本公共卫生服务内容。基本公共卫生服务所需经费由各级财政保障,覆盖全体居民,实现基本公共卫生服务均等化。

4、预防和控制重大疾病和公共卫生危害因素。贯彻实施国家重大公共卫生服务项目,结合上海经济社会发展实际,针对老年人、妇女、儿童等重点人群和主要健康问题,确定本市重大公共卫生服务内容。预防控制艾滋病、结核病、病毒性肝炎等重大传染病,加强对新发传染病的技术储备和防控。遏制心脑血管病、肿瘤、糖尿病等主要慢性非传染性疾病快速上升势头。健全公共卫生危害因素监测和健康效应评价体系。

5、加强城市公共卫生安全保障。完善公共卫生应急保障机制,建立统一的应急指挥体系,密切多部门和跨地域合作,加强联防联控。提升公共卫生应急能力,健全应急预案,加强实验室能力建设和相关物资储备,组建全市统一指挥的卫生应急处置队伍,提高响应速度和应急处置能力。

6、加强公共卫生监督。健全公共卫生监督体系,加强基层公共卫生网络建设,强化分级管理和属地管理。完善企业自律、行业管理、政府监管、社会监督的公共卫生管理框架,建立多部门联合执法机制,提升公共卫生监督力度和效能。加强职业病综合防治,强化用人单位职业病防治责任主体意识,加强职业健康监护,保障职业病患者合法权益。加强职业病防治机构建设。建立健全“两级政府、三级管理、四级网络”的食品安全监管体系

,加强食品安全风险预测预警和突发事件处置能力建设。加强与卫生监督需求相匹配的技术支撑能力建设。

(二)医疗服务体系:让居民得到便捷适宜的医疗服务。

1、完善医疗资源规划和配置。坚持以非营利性医疗机构为主体,营利性医疗机构为补充,公立医疗机构为主导,非公立医疗机构共同发展的办医原则,形成多种所有制并存,功能分工明确,医疗、康复、护理等门类齐全的医疗服务体系。根据城市总体规划调整和人口分布变化,完善医疗机构设置规划。在郊区新城、人口导入区域引进优质医疗资源。按照规划设置社区卫生服务机构和农村基层医疗卫生机构。加强存量资源盘活、整合,促进现有资源有效利用,鼓励社会力量参与,合理调整和补充康复、老年护理、精神卫生、妇幼卫生等医疗资源配置。营造公平的政策环境,引导社会资金进入医疗服务领域,形成公立医疗机构和非公立医疗机构有序竞争的格局。

2、落实各级医疗机构的功能定位。三级医院以诊治疑难重症和医学科研、教学为主要功能,服务全市、辐射全国。根据区域卫生规划和区域内居民的医疗服务需求,部分二级医院定位为区域医疗中心,提供常见病专科和急诊、重症医疗服务;部分二级医院转型为康复医疗机构或老年护理机构。社区卫生服务机构承担一般常见病、多发病、诊断明确的慢性病的诊疗和健康教育、预防、保健、康复、计划生育技术指导等“六位一体”综合服务,规范社区床位的分类管理,强化老年护理服务功能。

3、探索推进医疗资源整合。采取多种形式,推进医疗资源整合。探索以区域为基础,公立医院为主体,信息化为支撑,提高医疗资源利用效率、改善医疗服务、加强居民健康管理为目标,建立区域性医疗联合体,促进资源共享和统筹配置,加强联合体内各级医疗机构间的梯度支撑和分工协作,探索实施医疗联合体内统一医保预付、统一资源配置、统一运营管理。按照鼓励和自愿的原则,引导市民与医疗联合体签约,逐步推进分级医疗、社区首诊、双向转诊。

4、完善社区卫生服务体系。进一步强化社区卫生服务机构在公共卫生和基本医疗服务中的“网底”作用。加快社区全科医学、公共卫生人才培养,加强三、二级医院和专业公共卫生服务机构对社区的人才和技术支持,全面提高社区卫生服务机构的服务能力和技术水平,应用适宜技术、适宜设备和基本药物,使居民在社区可以获得良好的基本公共卫生和基本医疗服务。进一步健全以全科团队为基础的社区卫生服务模式,建立家庭医生制度,加强对社区居民的健康管理;逐步实

施家庭医生首诊、定点医疗和转诊制度,使家庭医生逐步成为居民健康的“守护人”。按照降低费用、提高水平、规范功能、加强管理的目标,进一步深化社区卫生服务综合改革,切实实行收支两条线管理、医保总额预付、绩效考核等措施,强化政府主导,凸显公益公平,提高服务水平和绩效。

5、促进中医药事业发展。不断完善促进中医药事业发展的政策措施,推动中医药继承和创新,保持和发扬中医药特色优势,促进中医药现代化、国际化,实现中医药医疗、保健、教育、科研、产业、文化全面协调发展。加快建设符合中医医疗特点,由综合性中医院、中医门诊部、中医专科诊所、综合性医院中医科、社区卫生服务中心中医科等组成的中医药服务网络。推广中医药适宜技术,加强社区中医药服务能力建设,发挥中医药在预防保健中的作用,推动中医药服务进社区、进农村、进家庭。

6、发展现代医疗服务业。以国际医学园建设为抓手,充分利用国际国内两个市场、两种资源,点面结合、重点突破,着力推进上海现代医疗服务业向国际化一流水平方向发展。区域卫生规划要为社会办医留出空间,符合区域卫生规划的新增医疗资源优先考虑社会办医。引进国际知名品牌医疗资源,发展规模较大、技术优势明显、管理和服务与国际接轨的国际性医疗机构,积极推进本市医疗机构与国际医疗保险接轨。促进医疗旅游、健康管理、高端医疗、整形美容等现代医疗服务业态的发展。

(三)医疗保障体系:让居民不因经济困难看不起病。

1、保障居民基本医疗。贯彻国家关于完善医疗保障体系的要求,完善本市医疗保险制度,形成由城镇职工基本医疗保险、城镇居民基本医疗保险、新型农村合作医疗为主体,覆盖城市就业人口、城市非就业人口、农业人口、外来从业人员的基本医疗保险制度体系,逐步建立城乡统筹的基本医疗保险制度。从老年护理保障计划起步,探索建立老年护理保障制度。推进各类医疗保障制度的衔接和整合,根据经济社会发展,提高新型农村合作医疗的统筹层次和筹资水平,逐步缩小各类基本医疗保险制度之间的筹资和保障待遇差距,形成合理的医保待遇梯度。制定本市不同医保制度之间有效的转移衔接办法。

2、保障居民重病大病。根据经济社会发展,逐步提高医保基金支付限额,加大对居民重病大病的保障力度。完善医保综合减负措施,对超过医保基金支付限额的,按照相关规定再给予报销。完善医疗救助制度,对困难人群参保及其难以负担的医疗费用提供补助。加大对低收入人群和因病致贫“支出型”贫困人

群的综合帮扶力度。

3、保障多层次就医需求。发展和完善本市现行的“职工医疗互助保障计划”、“中小学生、婴幼儿住院互助基金”、“市民社区医疗互助帮困计划”等补充医疗保险。进一步落实补充医疗保险政策,鼓励用人单位为职工解决基本医疗保障之外的需求。大力培育商业健康保险,鼓励开发适应不同需要的商业健康保险产品。引导商业保险机构开展管理式医疗和第三方管理健康保险服务,探索以政府购买医疗保障服务的方式,委托具有资质的商业保险机构经办补充医疗保障服务。推动补充医疗保险机构、商业保险机构和医疗机构、基本医疗保险机构的合作,鼓励数据共享,探索直接结算,简化理赔手续。

4、加强医疗费用合理控制。完善医保预算管理,加强医保基金支出监管,确保医保基金收支平衡。完善各项医保管理措施,制定医疗保险监督管理办法,强化定点医疗契约化管理,规范定点医疗机构医疗服务行为;探索定点医疗机构分级管理,建立基本医疗保险对基本医疗服务的监督评价体系。将控制不合理的医药费用增长作为核心指标,纳入公立医疗机构院长绩效考核体系和医院等级评审体系。推进医疗机构检验检查结果互认,减少重复检验检查。加强对定点医疗机构、定点零售药店、执业医师、执业药师和居民医疗费用支出监管,切实减轻居民医疗费用负担。

5、完善医保支付方式。完善医保定点医疗机构的医保支付方式,逐步试行和完善医保总额预付制。研究按照病种付费和按照人头付费的支付方式。不断深化医保和医疗联动改革,通过完善医保支付方式,建立对医疗机构的激励约束机制,促进医疗机构加强科学化、精细化管理,积极主动控制医疗费用,不断改善医疗服务,保障参保人员合理的医疗需求,提高参保人员满意度。

(四)药品供应保障体系:让居民用药更安全、更便宜、更科学。

1、实施基本药物制度。在国家基本药物目录基础上,制定本市基本药物增补目录。社区卫生服务中心等基层医疗卫生机构全部配备、使用基本药物,实行零差率销售。其他医疗卫生机构也要将基本药物作为首选药物并确定使用比例。基本药物全部纳入基本医疗保障药品报销目录,报销比例明显高于非基本药物。各级医疗机构要按照国家基本药物临床应用指南和基本药物处方集,加强合理用药管理,确保规范使用基本药物。

2、完善药品集中招标采购办法。建立政府主导、全市统一的药品招标采购平台。坚持全国统一市场,不同地区、不同所有制企业平等参与、公平竞争,实行药品网上集中公开招标采购。在国家零售

指导价格规定的幅度内,根据招标形成的采购价格、配送费用及药品加成政策,确定药品的零售价格。加强药品购销合同管理,明确品种、规格、数量、价格、回款时间、履约方式、违约责任等内容,履行合同规定的责任和义务。实行基本药物单一货源承诺、量价挂钩的采购模式,明显降低基本药物价格,由中标药品生产企业自主选择具有资质的药品经营企业,实施统一配送。

3、规范药品生产流通。完善医药产业发展政策和行业发展规划,以规范药品研制为手段,推动企业提高自主创新能力和产业结构优化升级,继续支持药品现代物流配送和零售药店连锁经营,鼓励药品生产企业、流通企业的整合。支持临床必需、不可替代、用量不确定、不常生产的药品生产、供应,完善药品储备制度。完善药品生产、配送质量管理规范。推进药品现场快检初筛工作,对基本药物生产、经营、使用环节实施全覆盖抽检,定期向社会公布抽检结果。推进基本药物全品种电子监管。加强和完善药品不良反应监测,建立健全药品安全预警和应急处置机制,完善药品召回管理制度。

二、完善体制机制,保障医药卫生体系有效规范运转。立足转机制、惠民生,完善医药卫生的管理、运行、投入、价格、监管体制机制,加强科技与人才、信息、社会支持系统建设,推进和完善政事分开、管办分开、医药分开、营利性非营利性分开,健全制度体系,保障医药卫生事业科学发展。

(一)建立协调统一的医药卫生管理体制。

探索成立统筹协调本市卫生和健康工作的议事协调机构,探索加强公共卫生、医疗服务、医疗保障、药品供应保障联动的有效方式,健全政府部门间的协调机制,形成政策合力。推进和完善政事分开、管办分开,转变政府职能,强化公共服务和社会管理职能。明确不同层级政府的职责范围,落实属地化管理的权责,加强对各级各类、各种隶属关系和所有制性质医疗卫生机构的全行业管理。

(二)建立维护公立医疗机构公益性的运行机制。

健全公立医疗机构法人治理结构。加强对公立医疗机构的管理,着力构建以战略规划、全面预算、绩效考核、质量管理、资产监管、审计监督为核心的专业化管理制度。严格公立医疗机构预算管理和收支管理,加强成本核算和控制,实施内部审计和外部审计制度,按照规定设置总会计师,逐步实行总会计师委派制度。推广临床路径,支持医疗机构使用适宜医疗技术和基本药物,进一步推进病种规范化诊疗。通过适当调整医疗服务价格、增加政府投入、改革支付方式等多种措施,积极探索改革以药补医机制,

控制医药费用的不合理上涨。科学合理核定公立医疗机构人员编制,健全以聘用制度和岗位管理为主要内容的人事管理制度,优化人力资源结构。逐步完善符合卫生人才特点、注重综合素质、体现实际能力和业绩的卫生人才评价机制。完善公立医疗机构内部管理,实行不直接与医疗服务收入挂钩的医院工资总额预算管理制度,建立以岗位工作量、服务质量、患者满意度等为核心的绩效考核机制和科学合理的收入分配制度,充分体现医务人员的技术劳务价值,保障医务人员收入水平,调动医务人员积极性。

(三)完善政府主导的多元卫生投入机制。

完善政府主导的多元卫生筹资机制,强化政府投入责任,引导社会资金参与发展卫生事业。政府卫生投入增长幅度要高于财政经常性支出的增长幅度,使政府卫生投入占财政经常性支出的比重逐步提高。合理控制卫生总费用增长,调整卫生总费用结构,逐步提高政府投入占卫生总费用的比例,合理控制个人支出占卫生总费用的比例。

完善公共卫生服务经费保障机制。对医疗卫生机构提供基本公共卫生服务项目所需经费,由政府在全面考核评价的基础上,采取购买服务等方式予以补助。根据国家重大疾病预防控制的要求,合理安排艾滋病、结核病等重大疾病防治、国家免疫规划等重大公共卫生服务项目所需资金。专业公共卫生服务机构的基本建设、设备购置等发展建设支出,由政府根据公共卫生事业发展需要足额安排;人员经费、公用经费和业务经费根据人员编制、经费标准、服务任务完成及考核情况,由政府预算全额安排;按照职能定位,清理规范专业公共卫生服务机构收费,按照规定取得的收入,根据国库收缴制度规定,及时足额上缴国库或财政专户,纳入部门预算管理;探索实行专业公共卫生服务机构收支两条线管理。

完善社区卫生服务机构的政府投入机制。切实实行社区卫生服务机构收支两条线管理。政府办的社区卫生服务中心基本建设、设备购置等发展建设支出,由政府根据发展建设规划统筹安排;人员经费和业务经费通过服务收费和政府补助予以落实,政府补助按照核定任务、核定收支、绩效考核补助的办法核定。

完善政府对公立医院的补偿政策。对符合区域卫生规划的公立医院基本建设、大型设备购置、重点学科建设等发展建设支出,经专家论证和有关部门批准后,纳入政府专项补助项目库,由政府根据项目轻重缓急和承受能力逐年统筹安排。按照服务成本,保障政府指定的紧急救治、救灾、援外、支农、对口支援等公共服务经费,对承担的公共卫生服务任务给予专项

补助。探索对中医院(民族医院)、传染病医院、精神病院、职业病医院、妇产医院、儿童医院、康复医院、老年护理机构分类管理办法,在投入政策上予以倾斜。

完善政府对农村合作医疗、城镇居民基本医疗保险的补助政策,完善各类医疗互助和城乡医疗救助投入政策,保证经办机构工作经费。加大食品和药品监督管理能力建设的投入力度。完善应对重大、突发公共卫生事件的资金保障机制。

建立和完善财政资金使用安全性、规范性、有效性的监管机制,提高财政资金使用效率。

鼓励和引导社会资本发展医疗卫生事业,形成投资主体多元化、投资方式多样化的办医体制。建立健全规范的社会办医和外资办医审批程序,完善公平公正的行业管理政策,积极引导社会资本参与公立医院改制重组。

(四)建立科学合理的医药价格形成机制。

完善医疗服务定价机制。基本医疗服务价格按照合理补偿成本、兼顾居民和基本医疗保障承受能力的原则核定。逐步提高中医和体现医务人员技术劳务价值的诊疗、手术等项目价格,降低偏高的医用设备检查和治疗价格,从严控制以新设备、新试剂、新方法等名义新增医疗检查检验项目。在非营利性医疗机构的医疗服务价格实行最高指导价管理的基础上,实行分级定价,适当拉开不同级别医疗机构和不同职级医师的服务价格。

完善药品价格形成机制。药品定价遵循补偿成本、合理盈利、反映供求的原则。改进定价方法,提高透明度和科学性。通过药品集中招标采购等,进一步降低偏高的药品价格,适当提高临床必需但市场不能保证供应的廉价药品价格。对可替代药品和创新药品定价,逐步引入药物经济学评价方法,促进不同种类药品保持合理比价关系。对仿制药品实行后上市价格从低定价制度,抑制低水平重复建设。完善按照价格高低实行差别加价的政策,逐步降低药品加价率,条件成熟时取消医疗机构销售药品加价率。加强医用耗材及植(介)入类医疗器械价格的控制和管理。

建立药品和医疗服务价格动态调整制度。建立和完善医药市场价格调查、监测和信息采集分析制度。

(五)促进医学科技发展和人才队伍培养。

以总体规划、集成优势、突出重点、整体提升为原则,分层次、分类型规划建设临床医学中心和医学重点学科,加强医学领军人才、学科带头人、优秀青年医学人才培养,形成多层次医学学科建设和人才培养的长效机制。整合资源,集成优势,建设若干高层次的医学研究机构,提高上海医学的自主创新能力。大力推进转化医学发展和医学知识服务平台建设,促进基础医学研

究更好地向临床和预防应用转化,解决临床和公共卫生中的实际问题,切实有效降低医疗费用。建立健全住院医师、全科医师、专科医师规范化培训和继续医学教育制度,形成符合国际惯例和医学人才成长规律的临床医师培养体系,从根本上提升临床医师队伍的整体素质,显著提升基层医疗卫生机构医务人员的技术水平。以卫生服务需求为导向,调整优化医学院校专业和课程设置,扩大紧缺专业招生规模。加强公共卫生、全科医学、中医学、康复、护理、药学、院前急救、卫生管理、医学信息等薄弱领域的人才培养。加强公共卫生学科建设和重大疾病防治科技攻关。加强食品安全专家队伍建设和学科带头人培养。加强乡村医生队伍建设。制定优惠政策,鼓励优秀卫生人才到农村、城市社区服务,对长期在城乡基层工作的卫生技术人员,在职称晋升、业务培训、生活待遇等方面给予适当的政策倾斜。稳步推动医务人员合理流动,研究探索注册医师多点执业。加强医疗卫生机构精神文明建设,不断提升医务人员的职业精神和人文素养,调动广大医务人员参与改革的积极性。

(六)加强医药卫生法制建设和行业监管。

逐步建立健全与基本医疗卫生制度相适应的地方卫生法规体系。研究推进本市基本医疗卫生立法,明确政府、社会、公民在促进健康方面的权利和义务,保障人人享有基本医疗卫生服务。完善地方卫生标准,深入宣传贯彻卫生标准。推进依法行政,严格规范执法,依法严厉打击各种危害居民健康和生命安全的违法行为。

建立以公益性为导向的医疗机构综合评价体系,加强部门联动,整合现有的医疗机构考核评价指标体系。建立涵盖医疗质量、医疗安全、医疗服务、适宜技术推广、医保基金管理和使用、运行效率、公共服务职能履行、精神文明建设等内容的综合评价指标体系,作为政府加强全行业管理、对医疗机构监管和调控的重要手段,评价结果成为财政投入、医保定点资格、院长绩效考核等的重要依据。

加强医疗机构准入管理,健全医疗服务监测网络,完善医疗服务评价体系。加强医疗质量和医疗安全管理,规范医疗服务行为。健全医务人员职业操守体系,完善医务人员职业道德档案。加强对医疗保险基金监管,建立医疗保险基金有效使用和风险防范机制。完善药品监管体系建设,严格药品研究、生产、流通、使用、价格和广告的监管。建立信息公开、社会多方参与的监管制度,加强行业自律,鼓励社会组织和个人对政府部门、医药卫生机构进行独立评价和监督。

(七)完善以居民健康管理为核心的卫生信息化系

统。

发挥医药卫生信息化的基础性作用,以居民健康管理为核心,实现人人享有电子健康档案,共享利用健康信息,促进医疗卫生服务从单纯防病治病向健康综合管理转变;强化医疗卫生服务信息的挖掘和分析,促进医疗卫生管理从粗放式向精细化转变;加强卫生服务需求评价,使政府部门和医疗机构更好地把握和响应居民的医疗服务需求,促进政府职能从管理型向服务型转变。

完善公共卫生信息系统,提高疾病预测预警能力。推进标准化社区卫生信息系统建设,提高社区健康服务水平。以医院管理和电子病历为重点,加强医院信息化建设。加强医疗保障信息系统建设,完善基金管理、费用结算与控制、医疗行为管理、参保单位和个人管理与服务等功能。完善药品安全监管、药品供求、采购、使用和药品不良反应监测等信息网络。建设上海健康信息网,实现公共卫生、医疗服务、卫生管理等各个系统互联互通,为居民享有方便、高效、优质的医疗卫生服务提供信息支撑。

(八)形成全社会支持医药卫生事业发展的合力。

广泛调动社会资源,支持和发展医药卫生事业。设立上海市卫生发展基金会,鼓励社会对医药卫生事业捐资捐助。加强健康知识宣传教育,营造全社会尊重医学科学、尊重医务人员的良好氛围,推动构建和谐的医患关系,引导居民科学就医,为深化医药卫生体制改革营造良好的舆论环境。建立医患纠纷第三方调解机制,依法维护正常的医疗服务秩序,保护患者和医务人员的合法权益。

三、积极稳妥推进医药卫生体制改革

(一)提高认识,加强领导。

各级党委、政府要充分认识深化医药卫生体制改革的重要性、艰巨性、紧迫性,切实加强组织领导,落实责任制度,明确任务和进度,保证各项改革顺利推进。成立市医药卫生体制改革领导小组,从市级层面统筹规划和组织实施医药卫生体制改革。市医药卫生体制改革领导小组办公室设在市发展改革委,具体负责日常工作。各有关部门要认真履职、密切配合、精心组织、形成合力,有序推进改革。各区县要参照市医药卫生体制改革领导小组的模式,在区县党委、政府的领导和市医药卫生体制改革领导小组的指导下,成立相应工作机构,按照本实施意见的要求,因地制宜制订本地区的具体实施方案,精心组织落实。要加强医改监测评价工作,确保改革措施落实到位、改革成果惠及全体居民。

(二)突出重点,分步实施。

实现人人享有基本医疗卫生服务的目标,建立覆盖城乡居民的基本医疗卫生制度,既要着眼长远的制度设计,也要力争尽快取得实效。要坚持远近

结合,从基础和基层起步。近期要重点抓好基本公共卫生服务、基本医疗服务、基本医疗保障、基本药物制度、公立医院改革试点、社区卫生综合改革、医学学科建设和人才培养、基于居民电子健康档案的卫生信息化工程、发展现代医疗服务业和切实解决居民看病就医中的突出问题等10项改革。各有关部门要明确工作任务,认真履行职责,抓紧制定操作性文件和具体方案,明确实施步骤,搞好配套衔接,协调推进各项改革。一些重大改革要先行试点,积极探索有效的实现途径,及时总结经验,逐步推开实施。

(三)加强宣传,正确引导。

要坚持正确的舆论导向,周密制订宣传方案,通过新闻媒体等,广泛宣传深化医药卫生体制改革的重大意义、目标任务和政策措施,引导社会合理预期,使改革深入基层、深入人心,调动和发挥各方面参与、推进改革的积极性、主动性、创造性,为深化改革创造良好的社会环境。

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范文七:大肠菌群的测定 投稿:胡雖雗

大肠菌落计数的平板计数法

检验方法:

分离培养与菌种鉴定、计数:

1.1 样品的稀释

1.1.1 固体和半固体样品:称取25 g 样品,放入盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,

8000 r/min~10000 r/min 均质1 min~2 min,或放入盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质袋

中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min,制成1:10 的样品匀液。

1.1.2 液体样品:以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶

(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10 的样品匀液。

1.1.3 样品匀液的pH 值应在6.5~7.5 之间,必要时分别用1 mol/L NaOH 或1 mol/L HCl 调节。

1.1.4 用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1 mL,沿管壁缓缓注入9 mL 磷酸盐缓冲液

或生理盐水的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1 支1 mL 无菌

吸管反复吹打,使其混合均匀,制成1:100 的样品匀液。

1.1.5 根据对样品污染状况的估计,按上述操作,依次制成十倍递增系列稀释样品匀液。每

递增稀释

1 次,换用1 支1 mL 无菌吸管或吸头。从制备样品匀液至样品接种完毕,全过程不得超过15 min。

1.2 平板计数

1.2.1 选取2个~3个适宜的连续稀释度, 每个稀释度接种2个无菌平皿,每皿1 mL。同时取1 mL生理盐

水加入无菌平皿作空白对照。

1.2.2 及时将15 mL~20 mL冷至46 ℃的结晶紫中性红胆盐琼脂(VRBA)约倾注于每个平皿中。小心

旋转平皿,将培养基与样液充分混匀,待琼脂凝固后,再加3 mL~4 mLVRBA覆盖平板表层。翻转平

板,置于36 ℃±1 ℃培养18 h~24 h。

1.3 平板菌落数的选择

选取菌落数在15 CFU~150 CFU 之间的平板,分别计数平板上出现的典型和可疑大肠菌群菌落。

典型菌落为紫红色,菌落周围有红色的胆盐沉淀环,菌落直径为0.5 mm 或更大。

1.4 证实试验

从VRBA 平板上挑取10 个不同类型的典型和可疑菌落,分别移种于BGLB 肉汤管内,36 ℃±1 ℃

培养24 h~48 h,观察产气情况。凡BGLB 肉汤管产气,即可报告为大肠菌群阳性。

1.5 大肠菌群平板计数的报告

经最后证实为大肠菌群阳性的试管比例乘以1.3中计数的平板菌落数,再乘以稀释倍数,即为每g

(mL)样品中大肠菌群数。例:10-4样品稀释液1 mL,在VRBA平板上有100个典型和可疑菌落,挑取

其中10个接种BGLB肉汤管,证实有6个阳性管,则该样品的大肠菌群数为:100×6/10×104/g(mL)=6.0×105 CFU/g(mL)。

范文八:粪大肠菌群的测定 投稿:钱尨尩

LPEMS⁄ZYA-43-2011

生活饮用水中耐热大肠菌群、总大肠菌群、

大肠埃希氏菌的测定

——酶底物法

一、 实验原理

该革新的检测技术利用分别由大肠菌群β-半乳糖苷酶及大肠杆菌β-葡萄糖醛酸酶代谢的两种「营养剂─指示剂」:邻硝基苯-β-D-半乳派喃糖(ONPG)及甲基香豆基葡糖醛酸苷(MUG),作为Colilert试剂的主要碳源。

1、利用大肠菌群细菌能产生β2 半乳糖苷酶分解ONPG 使培养液呈黄色,检测大肠菌群;

2、利用大肠埃希氏菌产生β2 葡萄糖醛酸酶分解MUG 使培养液在波长366nm 紫外光下产生蓝色荧光,检测大肠埃希氏菌;

3、改变培养温度,可检测耐热大肠菌群。

因为大多数非─大肠杆菌属菌类没有这些酶,所以无法在Colilert试剂里生长及干涉这些物质。而有这些酶的少数非─大肠杆菌属菌类会受到Colilert特殊配方的基质选择性的抑制作用(专利技术)。

二、 仪器和试剂耗材

1、检测设备—程控定量封口机Quanti-Tray

Sealer Model 2X 美国IDEXX;

2、可充电紫外灯,6W,220V,366nm;

3、紫外线防护镜;

4、DST酶底物法24小时Colilert试剂 美

程控定量封口机

国IDEXX;

5、51孔定量盘(无菌);97孔定量盘

(无菌)

6、阳性标准比色瓶,阳性51孔标准比

色盘;

7、100mL含硫代硫酸钠无菌取样袋/瓶;

MUG试剂(科立得) 定量盘(51孔或者97孔) 取样瓶

8.记号笔;

9.无菌剪刀;

10.无菌夹子;

11.一次性医用无菌手套。

四、实验步骤

1.操作流程图

酶底物法即可以作定性又可以作定量分析,同时检测两个指标,总大肠菌群(total coli)和大肠埃希氏菌(Escherichia coli),方法简便,快速,结果准确。

2.操作说明

注意:如果不按照说明使用机器,可能会有人员伤害、机器损害、其他财产损害以及出现检测结果不准确。

(1) 操作前后或离开实验室必须用肥皂或消毒液洗手。

(2) 打开电源开关,橙黄色指示灯应当亮起。

(3) 程控定量封口机需要预热直到绿色指示灯亮起(大约10分钟)。只有当两个灯都亮时,才说明机器达到工作温度。

(4) 大肠菌群、大肠埃希氏菌:取100mL水样加入酶底物试剂1支混匀,转入51孔或97孔定量盘内(注意:在取水样和去定量盘时手不能触碰到含有少

量硫代硫酸钠的无菌取样瓶及定量盘封口处,以免影响检测结果),封口后于36±1℃培养24h,观察结果。耐热大肠菌群:实验同上,但培养温度变为44.5±0.5℃

(5) 把橡胶垫放到进口托盘架上,有大矩形孔的一头在外。

(6) 把装有样品和DST Colilert试剂的定量托盘放入橡胶垫中,注意定量托盘的每个凹陷要对准橡胶垫上对应的空。

(7) 向机器方向轻轻推动橡胶垫,直到机器抓住橡胶垫,并带动其进入机器。

(8) 大约15秒钟,定量托盘封口完成,从机器后出来。请从机器后拿出橡胶垫和定量托盘。

(9) 任何时候,如果需要使机器反转,从前面退出橡胶垫(例如当定量托盘没放平就将橡胶垫放入机器),请按反转钮。但是,当橡胶垫已经完全进入机器中,请不要按反转开关。如果有多个橡胶垫,可以连续放入机器。

(10) 在暗室中,使用6瓦,366nm的紫外灯在距样品15厘米左右的位置观测是否显荧光。

(11) 结果应在24-28小时内读取。此外,总大肠菌群和大肠埃希氏菌培养时间小于24小时已经为阳性;或总大肠菌群和大肠埃希氏菌大于28小时依然为阴性,则结果也有效。

◆注意:

1.检测试剂于2—30°避光储存;

2.a.使用过的取样统一收集进行灭菌处理;

b.橡胶插垫可以放到高压消毒锅中进行消毒,也可以用异丙醇或家用漂白剂清洗。清洗时应注意这些清洗剂的危害。要经常清洗橡胶插垫,确保橡胶插垫上不要有污垢。

一般情况下可使用柔软的干布清洗封口机外壳。也可以用异丙醇或家用漂白剂清洗,但要注意个人防护。

只有专门指定的人员才可以打开封口机的前挡盖。请参照保养手册,清洗封口机的内部。清洗工作一定要有经过培训的人员来完成。如果有样品从机器中滴

出,请不要打开前挡盖或使得封口机倾斜;

3.拿出定量盘后应尽快用无菌夹子夹住袋口,以免剩余定量盘被细菌感染;

4.使用后关掉机器;

5.

附表:

1.51孔定量盘法不同阳性结果的MPN值表

2.97孔定量盘法不同阳性结果的MPN值表

范文九:3M大肠菌群的测定 投稿:孙侻侼

食品卫生微生物学检验 大肠菌群的测定 国标(GB/T 4789.3—2008) 国标(GB/T 4789.3—2008)

实验目的

学习并掌握国标GB/T 4789.38—2008标准中 规定食品中大肠菌群的测定方法。

大肠菌群系指一群能发酵乳糖,产酸产气。需氧 和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。该菌主要来源 于人畜粪便,故此作为粪便污染指标来评价食品的卫 生质量,具有广泛的卫生学意义。它反映了食品是否 被粪便污染,同时间接地指出食品是否有肠道致病菌 污染的可能性。

食品中大肠菌群快速计数法 - Petrifilm™ 测试片法

原理

PetrifilmTM大肠菌群测试片 (PetrifilmTM Coliform Count Plate) 是一种预先制备好的培养基系统,含 有VRB (Violet Red Bile) 培养基,冷水可溶性凝胶 和氯化三苯四氮唑(TTC)指示剂,可增强菌落计数效 果。表面覆盖的胶膜,可截留发酵乳糖的大肠菌群产 生的气体。培养结束后计数红点周围有气泡的菌落为 大肠菌群数。

3M PetrifilmTM测试片的结构

设备和材料

1. 恒温培养箱:36±1℃ 2. 均质器(旋刀式或拍击式)或等效的设备。 3. pH计或精密pH试纸。 4. PetrifilmTM测试片压板。 5. 放大镜或/和菌落计数器或PetrifilmTM自动判读仪。

操作步骤

1. 样品制备 制备的1:10样品匀液,无菌操作调节样品匀液的 pH为6.5~7.5,酸性样液用1mol/L NaOH调节,碱性 样液用1 mol/L HCl调节。 2.稀释 对上述样品匀液做10倍系列梯度稀释,根据样品的 污染程度,选取适宜的2~3个连续稀释度,每个稀释 度接种2张测试片。

3. 接种 将PetrifilmTM大肠菌群测试片或PetrifilmTM 大肠杆菌/大肠菌群测试片置于平坦实验台面,揭开 上层膜,用吸管吸取1 mL样液垂直滴加在测试片的 中央,将上层膜缓慢盖下,避免气泡产生和上层膜 直接落下,把压板(平面底朝下)放置在上层膜中 央,轻轻地压下,使样液均匀覆盖于圆形的培养面 积上。拿起压板,静置至少1 min以使培养基凝固。

4. 培养

将测试片的透明面朝上水平置于培养箱内,堆 叠片数不超过20片,培养温度为36±1℃。 大肠菌群检测时培养时间为24±2h;大肠杆菌检 测时,如果是肉、家禽和水产品培养时间为24±2h, 如果是其它产品,培养时间为48±2h。

结果计算与报告

1.判读 目视、用菌落计数器、放大镜或PetrifilmTM自动 判读仪来计数。 在PetrifilmTM大肠菌群测试片上,红色有气泡的 菌落确认为大肠菌群数。培养圆形面积边缘上及边 缘以外的菌落不作计数。当培养区域出现大量气泡, 大量不明显小菌落或培养区呈暗红色三种情况,表 明大肠菌群的浓度较高,进一步稀释样品可获得准 确的读数。

在PetrifilmTM大肠杆菌/大肠菌群测试片上, 蓝色有

气泡的菌落确认为大肠杆菌。蓝色有气泡 和红色有气泡的菌落数之和为大肠菌群数。培养 圆形面积边缘上及边缘以外的菌落不做计数。出 现大量气泡形成、不明显的小菌落,培养区呈蓝 色或暗红时,进一步稀释样品可获得准确的读数。

2. 菌落计数 选取目标菌落数在15~150之间的测试片,计数 菌落数,乘以相对应的稀释倍数报告之。如果所有 稀释度测试片上的菌落数都小于15,则计数稀释度 最低的测试片上的菌落数乘以稀释倍数报告;如 果所有稀释度的测试片上均无菌落生长,则以小于 1乘以最低稀释倍数报告;如果最高稀释度的菌落数 大于150个时,计数最高稀释度的测试片上的菌落数 乘以稀释倍数报告。

计数菌落数大于150个的测试片时,可计数一 个或两个具有代表性的方格内的菌落数,换算成 单个方格内的菌落数后乘以20即为测试片上估算的 菌落数(圆形生长面积为20 cm2)。食品中最终菌 落浓度的单位以“cfu/g (mL)”表示,表面上菌落数以 “cfu/cm2”表示。

3M PetrifilmTM 大肠菌群测试片

• 含有改良的VRB培养基 • 目标菌落为红色带气泡 • 35±1°C, 24 ±2 h培 养 • AOAC Offical Method 991.14

3M PetrifilmTM 大肠杆菌/大肠菌群测试片

样品制备

样品制备

接种

接种

接种

培养

解释

范文十:《大肠菌群测定》预习 投稿:江攓攔

《大肠菌群测定》预习

这周上微生物做《大肠菌群测定》。部分在书本中“项目十二”、“任务12-1”中。

大家带着这些问题去预习,一定要预习找答案,不然明天上课就算安排时间看书预习也找不到答案了。因为多数问题都是书本以外的。个别问题可能你们解决不了,到时再共同解决。要把预习的题的答案写在练习本上。

1.你喜欢吃什么食品(生产的预包装食品)?请举出两个。

2.查找该两种食品的国标,看看国标里的指标分哪几类。

3.该国标中有没有微生物指标?请具体描述。

4.大肠菌群的测定是依据什么国标?

5.大肠菌群测定的目的是什么?意义何在?

6.大肠菌群的定义是?特点是?大肠菌群测定的国标方法里,怎么样确定有大肠菌群?

7.mpn法测定大肠菌群的原理是什么?怎么理解国标里面的mpn法?

8.预习时遇到的其他问题„„

ps,多用用搜索引擎。每组打印一份mpn法测定大肠菌群的国标。

Ps,因为实验时间跨度大,所以需要从周一开始做,因此你们需要在今天(周日)预习好的。

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